Les Insulin Like Growth Factors ou IGF (IGF-I ET IGF-II) sont des polypeptides mitogènes important dans la croissance et le développement et ils ont été très étudiés chez les mammifères. Cependant, l'application des techniques mammaliennes aux téléostéens a posé de nombreux problèmes d'hétérologie et n'a pas permis de comprendre leurs rôles chez les poissons pour lesquels, les études demeurent peu nombreuses. La mise au point d'outils homologues ayant déjà été effectuée pour l'IGF-I de salmonidés, nous avons focalisé notre travail sur l'IGF-II. Dans un premier temps, l'ADNC de l'IGF-II de truite arc-en-ciel (Oncorhynchus mykiss) a été cloné par RT-PCR et a ensuite été introduit dans un vecteur d'expression bactérien (parHS3) pour la production chez E. Coli de sa protéine recombinée (rtIGF-II). Les corps d'inclusion bactériens contenant 10 à 15% de rtIGF-II ont ensuite été solubilisés et la protéine a été purifiée. Plusieurs protocoles de purification ont été testes (chromatographie d'échange d'ions et filtration sur gel).Les meilleurs résultats ont été obtenus par chromatographie de filtration sur gel en conditions dénaturantes (rendement de purification final de 14% par rapport à la quantité totale de protéines bactériennes contenues dans les corps d'inclusion) avec une production finale de 820 g/litre de culture bactérienne. L'activité biologique de l'rtIGF-II a été évaluée par différents tests: capacité de liaison de l'rtIGF-II sur des préparations membranaires de placenta humain et de cerveau de truite, sulfatation du cartilage branchial de saumon, inhibition de la sécrétion de l'hormone de croissance (GH) par les cellules hypophysaires de truite, et multiplication des spermatogonies de truite. tous ces tests ont été effectués en comparaison avec les IGF humains utilisés comme référence. la protéine rtIGF-II s'est révélée peu active (environ 100 fois moins active que les IGF humains), probablement à cause de la mauvaise maîtrise des conditions de renaturation. Nous avons alors utilisé l'rtIGF-II comme antigène pour obtenir un antisérum chez le lapin (anti-rtIGF-II). Un dosage radio immunologique (RIA) sensible et spécifique a été mis au point en utilisant l'anti-rtIGF-II à la dilution initiale de 1/10 000ème. La sensibilité du RIA est de 0.1 NG/ML, ED50 de 0.75 0.06 NG/ML, et les variabilités intra et inter dosage sont respectivement de 4% (N=6) et de 4.6% (N=9). Les hormones hypophysaires de truite, l'insuline bovine et les IGF humains ne croisent pas avec l'antisérum. Des réactions croisées de 0.1 et 1% ont été détectées avec l'insuline purifiée de saumon et l'IGF-I recombiné de saumon, respectivement. il semble que les protéines porteuses des IGF dans le sérum (IGFBP) interfèrent dans le dosage. Elles ont donc été éliminées des échantillons plasmatiques par la technique d'extraction au Sephadex SP C-25. Les taux d'IGF-II sériques sont d'environ 20 à 30 NG/ML, ils sont plus faibles que chez les mammifères. Enfin, nous avons débuté une étude sur la régulation hormonale de la sécrétion de l'IGF-II chez la truite, en nous intéressant principalement à sa régulation par la GH. in vitro, la sécrétion hépatique de l'IGF-II a été augmentée par des doses croissantes de GH, de façon significative des 10 NG/ML (culture d'hépatocytes de truite en agrégats). In vivo, cette action n'a pas pu être observée (études des sécrétions journalières d'IGF-II, effet d'une augmentation et d'un effondrement des niveaux circulants de GH sur l'IGF-II plasmatique). Les autres hormones testées (insuline, hIGF-I et T3) n'ont pas eu d'effet sur les niveaux sériques et les sécrétions hépatiques d'IGF-II.